肌肉免疫组织化学和分子成像核心(模仿)

肌肉免疫组织化学和分子成像核心(模仿) 为肌肉研究人员提供专业知识和协议, 包括冷冻肌肉组织切片, 常见肌肉特征的组织学和免疫组化肌肉特征和影像学. 模仿提供自动图像分析软件 Myovision 下载,并将根据要求提供高通量图像定量.  

我们很自豪地支持basic, 临床和翻译研究旨在了解肌肉结构和功能的调节机制以及对身体活动和慢性疾病的影响. 如果您有任何问题或想安排咨询或预订模仿设备的时间(如下所列), 请 火狐体育下注.

模仿技术和协议

骨关节炎患者股外侧肌纤维类型分布的免疫组织化学分析. 比例尺= 100µm. 使用抗层粘连蛋白标记纤维边界, 可以分析总截面积和纤维类型的比截面积. 人体骨骼肌由三种肌球蛋白重链(MyHC)亚型组成, 2a和2x, 通过异构体特异性抗体鉴定. 纤维类型组成是影响肌肉收缩和代谢特性的一个因素. 由一种以上MyHC组成的混合纤维也可以在人体骨骼肌中找到. MyHC 1/2a纤维存在,但罕见,通常在活检中占总纤维的5%以下. 混杂的2a/2x纤维更常见,而纯2x纤维也很少见.

炸,C.S., B. Noehren J. 穆勒,M.F. Ubele P.M. 韦斯特盖特,P.A. Kern C.A. 彼得森(2014). 久坐成人对有氧训练的纤维类型特异性卫星细胞反应.  J. 杂志. 592:2625-2636.

Noehren B, Kosmac K, Walton RG, Murach KA, Lyles MF, Loeser RF, Peterson CA和Messier SP. (2018). 成人中度膝骨关节炎患者股四头肌细胞和分子特性的改变. 骨关节炎及软骨. 

人体肌肉冷冻切片的纤维型染色

小鼠骨骼肌表达4种myhc, 包括2 b, 哪些可以使用改进的免疫组织化学方案进行量化.

塔吉克族,C.M., K.A. Murach K.K. 弗里克,年代.R. 琼斯,年代.E. 乌鸦,维.A. 英格伦,我.J. 小Vechetti., V.C. Figueiredo B.M. 莱维坦J. 缎,J.J. 麦卡锡,C.A. 彼得森(2019). 训练后骨骼肌肥大时肌核密度升高,而去训练时肌核密度下降. Am. J. 杂志.2019.  


人股外侧肌卫星细胞(SCs, Pax7+)的免疫组化分析. 比例尺= 100µm. 抗层粘连蛋白用于划定纤维边界,1型肌球蛋白重链(MyHC)抗体用于确定纤维类型, 这样卫星细胞就可以被分配到特定的光纤类型.

炸,C.S., B. Noehren J. 穆勒,M.F. Ubele P.M. 韦斯特盖特,P.A. Kern C.A. 彼得森(2014).  久坐成人对有氧训练的纤维类型特异性卫星细胞反应.  J. 杂志. 592:2625-2636.

Noehren B, Kosmac K, Walton RG, Murach KA, Lyles MF, Loeser RF, Peterson CA和Messier SP. (2018). 成人中度膝骨关节炎患者股四头肌细胞和分子特性的改变. 骨关节炎及软骨. 

人体肌肉冷冻切片纤维类型特异性Pax7染色

小鼠肌肉冷冻切片纤维类型特异性Pax7染色


人腓肠肌中M2样巨噬细胞群的免疫组织化学划分. 骨骼肌巨噬细胞在肌肉修复和再生中具有已知的作用. 然而, 新出现的证据表明,巨噬细胞群体也是肌肉生长和维持的重要因素, 尤其是在衰老方面, 肥胖与疾病.

巨噬细胞染色方法论文


设备

  • MICROM HM525低温恒温器 -用户友好,这种低温恒温器可以设置为+5和-35°C之间的温度. 切割厚度范围为1 ~ 500 μm. 完全电动舞台头自动收回和重新定位,以实现最佳切片. LED显示屏允许跟踪车轮旋转或行程长度,从而更容易跟踪组织安装的使用情况. 配备Peltier元件,用于快速冷冻标本.
  • MICROM HM525NX低温恒温器 HM525的新版本, 这个更新的低温恒温器完全数字化, 触摸屏控制允许更精细的调整截面厚度. 比如HM525, 525NX有一个配备珀尔帖元件的低温棒,可以冷却到-60°C, 用于标本的快速冷冻.
  • 蔡司AxioImager M1立式荧光显微镜 -配有半自动舞台和过滤轮, AxioImager可以获取整个切片图像(缝合). 该范围配备了四个荧光过滤器(DAPI), FITC, TRITC和Cy5)和4个空中目标(5x, 10x, 20倍和40倍)加上100倍的石油物镜. 荧光用X-cite 120灯和液体导光器照射. 彩色相机(AxioCam ICc5)获得高分辨率的亮场图像(500万像素), 使用高灵敏度黑白相机(AxioCam MRm)获取荧光图像。. 图像采集使用蔡司的Zen blue软件完成.
  • 蔡司AxioObserver D1倒置荧光显微镜 - AxioObserver D1是一个全手动范围配备了一个彩色(AxioCam MR)和一个黑白(AxioCam MRm)相机. 荧光用X-cite 120灯和液体导光器照射. 这台显微镜上有四种可用的滤镜:DAPI, FITC, 活塞式GFP(窄波段有助于减少自身荧光)和TRITC. 可用的物镜包括:4倍,10倍,32倍,40倍和125倍. 图像由Axiovision软件采集.
  • 奥林巴斯BX61VS直立荧光显微镜 奥林巴斯BX61VS有一个全自动的舞台,一次可以容纳5个幻灯片. 这台显微镜是伟大的成像大量的载玻片,可以捕捉整个组织切片,甚至整个载玻片. 2x, 10x, 20倍和40倍的空中物镜可用于捕获全景图像或高放大马赛克图像. BX61VS配备了两种颜色(派克F505, 500万像素)和一个黑白相机(奥林巴斯XM10),用于明亮的视野或荧光成像. 四个荧光滤光片可用于多通道成像(DAPI), FITC, TRITC和Cy5)和荧光用X-cite 120灯和液体导光管照射. 图像由VSI软件采集. 
  • 具有完全授权版本的Zen blue的独立工作站 -除了图像捕获, 我们有3个独立的工作站,拥有完全授权的Zen版本. 这些工作站可以安排在图像捕获之后进行更复杂的分析. 一个工作站包括一个微软感知像素, 55英寸触控显示器, 在概述特定结构时非常有用. 

可以使用我们的Sharepoint日历安排设备(培训完成后提供链接).

  • 禅宗Lite - ZEN生活允许您打开,查看,更改显示,导出图像文件获得与ZEN蓝(.CZI). 它还具有一定的测量和分析功能.
  • OlyVIA - OlyVIA允许您打开和查看使用奥林巴斯BX61VS显微镜获得的图像文件(.VSI).
  • 图像J -由美国国立卫生研究院提供的免费软件, 图像J有几个插件,可以打开各种文件类型供查看, 保存或分析.
  • 光谱观众/分析 -如果您不确定要将哪些荧光标签配对在一起, 这些观看器可以通过在一个显示器中显示多个荧光团的激发和发射光谱来帮助您做出最佳选择.